Molecular epidemiology of carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii from southern Brazil / Epidemiologia molecular de Acinetobacter baumannii resistente aos carbapenêmicos provenientes do sul do Brasil / Epidemiología molecular de Acinetobacter baumannii resistente a carbapenem del sur de Brasil

Background and Objectives: carbapenem resistance in Acinetobacter baumannii has reached extremely high levels worldwide, and class D OXA-type carbapenemases are the main associated mechanism. This study aimed to assess the phenotypic and molecular profile of clinical carbapenem-resistant A. baumannii (CRAb) isolates from a southern Brazilian border region. Methods: A. baumannii species was identified by the presence of the blaOXA-51 gene, and the susceptibility profile was determined by broth microdilution. The main carbapenemases were investigated by PCR and the molecular typing was performed by PFGE. Results: during the study, a total of 36 CRAb were recovered, of which 85.7% were from respiratory tract samples from ICU patients. High level resistance to were found in contrast to 100% of susceptibility for polymyxin B. The blaOXA-23 gene was present in 34 isolates and was the only one detected other than blaOXA-51. Molecular typing revealed the presence of four clonal strains, two of them endemic during the period of the study. Conclusion: to the best of our knowledge, our study brings the first data about resistance profile in Acinetobacter in the western border of southern Brazil and make aware of endemic clones of CRAb-producing-OXA-23 in this region of state, contributing for the construction of the national epidemiologic scenario of CRAb.(AU)

Justificativa e Objetivos: a resistência aos carbapenêmicos em Acinetobacter baumannii atingiu níveis extremamente altos em todo o mundo, e as carbapenemases do tipo OXA classe D são o principal mecanismo associado. O objetivo deste estudo foi avaliar o perfil fenotípico e molecular de isolados clínicos de A. baumannii resistentes aos carbapenêmicos (CRAb) de uma região de fronteira do sul do Brasil. Métodos: a espécie A. baumannii foi identificada através da presença do gene blaOXA-51, e o perfil de sensibilidade foi determinado por microdiluição em caldo. As principais carbapenemases foram investigadas por PCR, e a tipagem dos isolados de CRAb foi realizada por PFGE. Resultados: durante o período do estudo, 36 CRAb foram recuperados, dos quais 85,7% foram provenientes de amostras do trato respiratório de pacientes de UTI. Uma elevada resistência a aminoglicosídeos e fluoroquinolonas foi encontrada em contraste com 100% de sensibilidade a polimixina B. O gene blaOXA-23 foi encontrado em 34 isolados e foi o único detectado além do blaOXA-51. A tipagem molecular revelou a presença de quatro linhagens clonais, duas delas endêmicas ao longo do período do estudo. Conclusão: nosso estudo traz os primeiros dados sobre o perfil de resistência em Acinetobacter na fronteira oeste do sul do Brasil e alerta para a presença de clones endêmicos de CRAb produtores de OXA-23 nessa região, contribuindo para a construção do cenário epidemiológico nacional de CRAb.(AU)

Justificación y Objetivos: la resistencia a carbapenémicos en Acinetobacter baumannii ha alcanzado niveles extremadamente altos en todo el mundo y las carbapenemases OXA de clase D son el principal mecanismo asociado. El objetivo de este estudio fue evaluar el perfil fenotípico y molecular de los aislados clínicos de A. baumannii resistentes a carbapenémicos (CRAb) de una región fronteriza en el sur de Brasil. Métodos: la especie A. baumannii se identificó a través de la presencia del gen blaOXA-51 y el perfil de sensibilidad se determinó por microdilución en caldo. Las principales carbapenemasas fueron investigadas por PCR y la tipificación se hizo con PFGE. Resultados: durante el período de estudio, se recuperaron 36 CRAb, 85,7% de muestras del tracto respiratorio de pacientes de la UCI. Se encontró una alta resistencia a los aminoglucósidos y las fluoroquinolonas en contraste con 100% de sensibilidad a polimixina B. El gen blaOXA-23 se encontró en 34 aislamientos y fue el único detectado además de blaOXA-51. La tipificación molecular reveló la presencia de cuatro cepas clonales, dos de ellas endémicas durante el período de estudio. Conclusiones: hasta donde sabemos, nuestro estudio trae los primeros datos sobre el perfil de resistencia en Acinetobacter en la frontera oeste del sur de Brasil y reconoce los clones endémicos de CRAb productores de OXA.(AU)

A practical molecular identification of nonfermenting Gram-negative bacteria from cystic fibrosis

Abstract Identification of nonfermenting Gram-negative bacteria (NFGNB) of cystic fibrosis patients is hard and misidentification could affect clinical outcome. This study aimed to propose a scheme using polymerase chain reaction to identify NFGNB. This scheme leads to reliable identification within 3 days in an economically viable manner when compared to other methods.

Antimicrobial susceptibility of Salmonella Gallinarum and Salmonella Pullorum isolated from ill poultry in Brazil / Suscetibilidade a antimicrobianos de Salmonella Gallinarum e Salmonella Pullorum isolados de aves doentes no Brasil

ABSTRACT: Salmonella Gallinarum (S. Gallinarum) and Salmonella Pullorum (S. Pullorum) are poultry host-specific, agents of fowl typhoid and pullorum disease, respectively. These biovars cause septicemic infections, resulting in high mortality. Outbreaks are frequently reported worldwide, causing losses due to the elimination of infected flocks and treatments. The use of antimicrobial agents is frequent in poultry farms to prevent or treat gastrointestinal infections. In the present research it was evaluated the antimicrobial susceptibility of 50 S. Gallinarum and S. Pullorum isolates, from outbreaks that occurred between 1987 to 1991 and 2006 to 2013. The comparison of the susceptibility profiles showed that all isolates were susceptible to β-lactams. All isolates from 1987-1991 were susceptible to all antibiotics tested except NAL and CIP (78%). The susceptibility profile of S. Gallinarum (2006 - 2013 period) was the following NAL (58%), CIP (63%), ENR (67%), TET (92%), FFC (96%) and SXT (96%). S. Pullorum isolates (2006 - 2013 period) showed the following susceptibility rates to NAL (65%), CIP (71%), ENR (94%) and TET (94%). All isolates were susceptible to β-lactams tested, however, resistance to quinolones and fluoroquinolones increased over time. Furthermore, low levels of resistance to other antibiotics were found in recent isolates, such as tetracyclines.

RESUMO: Salmonella Gallinarum (S. Gallinarum) e Salmonella Pullorum (S. Pullorum) são patógenos hospedeiro-específico de aves, agentes do tifo aviário e pulorose, respectivamente. Estes biovares causam infecções septicêmicas, resultando em alta mortalidade. Surtos são frequentemente relatados em diversos países, causando prejuízos devido à eliminação de lotes infectados e tratamentos. Agentes antimicrobianos são utilizados frequentemente em granjas avícolas para prevenir ou tratar infecções gastrointestinais. No presente trabalho, foi avaliada a susceptibilidade antimicrobiana de 50 isolados de S. Gallinarum e S. Pullorum, obtidos durante surtos que ocorreram entre 1987 a 1991 e entre 2006 a 2013. A comparação dos perfis de sensibilidade mostrou que todas as amostras são sensíveis aos β-lactâmicos. Todos os isolados de 1987-1991 foram sensíveis a todos os antibióticos testados, exceto NAL e CIP (78%). O perfil de susceptibilidade de S. Gallinarum (surtos de 2006 a 2013) foi NAL (58%), CIP (63%), ENR (67%), TET (92%), FFC (96%) e SXT (96%). Isolados de S. Pullorum (surtos de 2006 a 2013) apresentaram as seguintes taxas de sensibilidade: NAL (65%), CIP (71%), ENR (94%) e TET (94%). Todas as amostras foram sensíveis ao β-lactâmicos testados, no entanto, a resistência às quinolonas e fluoroquinolonas aumentou ao longo do tempo. Além disso, baixos níveis de resistência a outros antibióticos foram encontrados em isolados recentes, tais como as tetraciclinas.

Prior oropharyngeal colonization and ventilator-associated pneumonia

This study evaluated the relationship between previous colonization of the oropharynx and development of ventilator-associated pneumonia through the classification of genomic fingerprint pattern by pulsed-field gel electrophoresis of both oxacillin-resistant and oxacillin-susceptible Staphylococcus aureus isolates obtained from hospitalized patients in an intensive care unit.

First report of vancomycin-resistant Enterococcus faecalis in Uberaba, Minas Gerais state

In this study we report the first isolation of VanA-type vancomycin-resistant Enterococcus faecalis strains from two different patients hospitalized in the same intensive care unit at the hospital of Universidade Federal do Triângulo Mineiro (UFTM), Uberaba, Minas Gerais, Brazil.

Molecular characterization of enterococci harboring genotype and phenotype incongruence related to glycopeptide resistance isolated in Brazilian hospitals

Three Enterococcus faecalis and one Enterococcus faecium strains were characterized by plasmid profile, pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) and determination of antimicrobial minimal inhibitory concentrations. VanA elements were characterized by Long PCR, overlapping PCR and DNA sequencing. Enterococcal strains showed resistance to vancomycin and harbored the vanA gene, and three these were teicoplanin susceptible while one showed intermediate resistance to teicoplanin. Two E. faecalis strains showed indistinguishable PFGE profile while the third was unrelated. E. faecalis strains showed a deletion in the right terminal region of the Tn1546-like element. The E. faecium strain showed an insertion element in the vanXY intergenic region. Mutations in VanA elements were not found. Rearrangements in the VanA element could be responsible for incongruities in genotype and phenotype in these strains.

Vancomycin-resistant van a phenotype Enterococcus faecalis: first case in Minas Gerais state and epidemiological considerations

We report the first case of vancomycin-resistant Enterococcus faecalis with VanA phenotype and vanA genotype isolated from a surgical patient in a general Hospital in Uberlândia, state of Minas Gerais, Brazil.

Spread of a methicillin-resistant staphylococcus aureus clone isolated from bacteremia in elderly patients in a Brazilian general hospital

A study of the genomic diversity of MRSA strains isolated from elderly patients with infection/colonization in three repeated prevalence, cross sectional studies was performed in the 1999-2000 period. In this study, 13 MRSA isolates from blood cultures and 5 from rectal and nare cultures were obtained from 18 patients (13 elderly and 5 adults). Most of the patients were being treated with two or more antimicrobials (83.3%), had insertion of invasive devices (88.9%) and were managed in ICU (Intensive Care Unit) and/or surgical units (66.7%). MIC (Minimum Inhibitory Concentration) data showed that 88.9% of the MRSA strains were resistant to high concentrations of oxacillin (MIC > 256 ìg/mL), 94.5% of the MRSA carried the mecA gene in their genome, and most (65.0%) of the isolates were indistinguishable according to their DNA finger­printing generated by PFGE (Pulsed-field gel electrophoresis). Although PFGE typing was performed with a few MRSA isolates, our results demonstrate that one MRSA clone was associated with infection/colonization in patients with an obvious connection among five out of eleven patients who stayed in the same clinic and ICU during the same period. Hospital acquired infection, a major “silent epidemy”, is associated with prolonged hospital stay and high mortality rate and its cause must be better evaluated.

Identification and molecular characterization of Van A-type vancomycin-resistant Enterococcus faecalis in Northeast of Brazil

The isolation of vancomycin resistant enterococci (VRE) in Brazil has rapidly increased, following the world wide tendency. We report in the present study the first isolation of vancomycin resistant Enterococcus faecalis (VRE) in the Northeast of Brazil. The four VRE isolates were characterized for antimicrobial susceptibility, genotypic typing by macro restriction of chromosomal DNA followed by pulsed-field gel electrophoresis and for characterization of the Tn1546-like element and plasmid contents. The isolates showed resistance to multiple antibiotics and a single genotype profile, suggesting the dissemination of a single clone among the patients. Tn1546 associated to genetic elements as plasmids shows the importance of infection control measures to avoid the spreading of glycopetide resistance by conjugative transfer of VanA elements.

Virulence-associated characteristics of Enterococcus faecalis strains isolated from clinical sources

Thirty-two clinical isolates of Enterococcus faecalis were screened for virulence factors. Twenty-four (75 percent) isolates produced hemolysin on Mueller-Hinton blood agar plates with sheep erythrocytes. However, the cell free heat-stable hemolysin was detected in all isolates (100 percent) of E. faecalis when grown in BHI-GA (BHI medium supplemented with 1 percent glucose and 0.03 percent L-arginine), but not in BHI broth alone. Twenty-four isolates (75 percent) produced caseinase and 23 (71.9 percent) lipase, but none of the isolates produced gelatinase. Fifteen (46.9 percent) culture filtrates caused rounding and membrane alterations with blebbing formation followed by death in HeLa and HEp-2 cells, but not in Vero cells. Thirteen isolates (40.6 percent) agglutinated rabbit erythrocytes, but did not produce hemagglutination in other bloods, containing or not 1 percent D-manose. Sixteen (50 percent) E. faecalis isolates adhered to HeLa cells and thirteen (40.6 percent) to HEp-2 cells, but all isolates adhered to polypropylene microtiter plates, indicating that clinical E. faecalis possess the ability to form biofilm in vitro. All the isolates were resistant to the bactericidal action of normal serum and did not produce aerobactin. These findings suggest that adherence and consequently biofilm formation on ephitelial host cells are the first steps in the E. faecalis virulence and that hemolysin, lipase, caseinase and other virulence factors act as causative of human epithelial cell damages.

Foram estudados os fatores de virulência de trinta e duas amostras de Enterococcus faecalis, isolados de casos clínicos. Vinte e quatro amostras (75 por cento) produziram hemolisina em ágar sangue preparado com hemácias de carneiro. No sobrenadante da cultura em BHI nenhuma amostra produziu hemolisina, no entanto quando cultivadas em meio BHI suplementado com 1 por cento de glucose e 0,03 por cento de L-arginina (BHI-GA), 100 por cento das amostras lisaram hemácias de carneiro. Vinte e quatro (75 por cento) amostras produziram caseinase e 23 (71,9 por cento) lipase, mas nenhuma amostra produziu gelatinase. Dezesseis (46,9 por cento) causaram arredondamento e alteração na membrana das células, com formação de vesículas e, em seguida, a morte das células HeLa e HEp-2. Treze amostras (40,6) aglutinaram eritrócitos de coelhos, mas não aglutinaram outros eritrócitos na presença ou na ausência de 1 por cento de D-manose. Dezesseis (50 por cento) aderiram em células HeLa e 13 (40,6 por cento) em células HEp-2, mas todas as amostras de E. faecalis aderiram na microplaca de polipropileno, indicando que E. faecalis isolados de casos clínicos possuem capacidade de formar biofilme "in vitro". Todos os isolados mostraram-se resistentes à ação bactericida do soro normal e não produziram aerobactina. Esses resultados sugerem que, inicialmente, a colonização ou infecção por E. faecalis ocorre pela aderência e formação de biofilme nas células epiteliais e a produção de hemolisina, lípase e caseinase pode atuar como fatores de virulência na infecção por E. faecalis.

Outbreaks associated to bloodstream infections with Staphylococcus aureus and coagulase-negative Staphylococcus spp in premature neonates in a university hospital from Brazil

Staphylococcus aureus e Estafilococos coagulase-negativa (ECN) estão entre os patógenos hospitalares mais importantes em pacientes de unidades de terapia intensiva neonatal, principalmente em infecções da corrente sanguínea. O principal objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência de infecções hospitalares por estes microrganismos usando dois sistemas de vigilância (laboratorial e "National Nosocomial Infection Surveillance" - NNIS) e determinar os fatores de risco mais importantes durante o período de dois anos (2001-2002). Dois surtos por ambos S. aureus suscetível a meticilina (1.5por cento) e ECN resistente à meticilina (1.0 por cento) foram observados, de janeiro a fevereiro/02 e agosto a setembro/02. Taxas de incidência endêmica de 3.77 por cento e 5.16 por cento para S.aureus e ECN foram detectadas respectivamente. Fatores de risco incluíram idade £7 dias, hospitalização 7 dias e utilização de cateter vascular central (CVC) de polietileno através de dissecação de veia (flebotomia), mas, nenhum desses fatores independentes foram confirmados pela análise multivariada. Por outro lado, ECN resistente à oxacilina prevaleceu (66.0 por cento) nos episódios epidêmicos. Análise molecular através de gel de eletroforese em campo pulsátil mostrou a natureza policlonal das amostras de S. aureus. Em conclusão, nós identificamos dois surtos de etiologia mista por S. aureus suscetível à meticilina e ECN resistente à meticilina associados à falta de material adequado (cateter vascular central) para neonatos, relacionados a procedimento invasivo. Os dois surtos foram controlados com a substituição de CVC de polietileno pelo cateter central de inserção periférica.

Emergence of VanB phenotype-vanA genotype in vancomycin-resistant enterococci in Brazilian hospital

No Brasil, enterococos resistente à vancomicina (VRE) têm sido descritos como patógenos hospitalares, desde 1998. Durante um monitoramento de VRE em um hospital, foram detectadas duas cepas de Enterococcus faecalis com genótipo vanA, e sensibilidade à teicoplanina. Este é o primeiro relato do isolamento de enterococo fenótipo VanB e genótipo vanA de amostra clínica no Brasil.

An outbreak of Acinetobacter baumannii septicemia in a neonatal intensive care unit of a university hospital in Brazil

We studied an outbreak of two multi-drug resistant clones of Acinetobacter baumannii in the Neonatal Intensive Care Unit of the Uberlândia Federal University Hospital in Minas Gerais state, Brazil, and we analyzed the contribution of cross-transmission in the rise in infection rates. Eleven neonates who developed multi-drug resistant A. baumannii nosocomial infection were matched to 22 neonates who were admitted to the same unit and did not develop an infection during the outbreak period, in order to identify risk factors for infection. Three out of the 11 neonates died. Epidemiological investigation included molecular typing, using pulsed field gel electrophoresis. Prior to the outbreak, from December 2001 to March 2002, no case of infection by this microorganism was diagnosed. Environmental and healthcare worker hand cultures were negative. Nine isolates had similar pulsed field gel electrophoresis patterns and two had another clone. The first clone was brought into the unit by an infected patient who was transferred from another hospital without a history of antibiotic use. The second clone did have its origin clearly defined. Both infected groups led us to conclude that several factors contributed to infection with A. baumannii. These factors were: exposure to antibiotics and invasive devices, birth weight < 1500g, age < 7 days and duration of hospitalization > 7 days. Based on logistic regression, infected neonates were more exposed to carbapenem and mechanical ventilation than the control group. Cross transmission between infants contributed to the rise in the rates of multi-drug resistant A. baumannii infection.

Antimicrobial resistance of Enterococcus sp. isolated from the intestinal tract of patients from a university hospital in Brazil

This study reports the results about antimicrobial resistance of Enterococcus spp. isolated from intestinal tract of patients from a university hospital in Brazil. The identification of strains at species level was performed by conventional biochemical tests, API 20 Strep (bioMérieux), and polymerase chain reaction assay. The specie distribution was E. faecium (34 percent), followed by E. faecalis (33 percent), E. gallinarum (23.7 percent), E. casseliflavus (5.2 percent), E. avium (1 percent), and E. hirae (1 percent). Intrinsic resistance to vancomycin characterized by presence of vanC genes was found in E. gallinarum and E. casseliflavus. The high prevalence of VanC phenotype enterococci is very important because these species have been reported as causing a wide variety of infections. Vancomycin-resistant E. faecium or E. faecalis were not found and no one isolate of these species was a beta-lactamase producer. Thirteen clinical isolates of enterococci (13.4 percent) showed multiresistance patterns, which were defined by resistance to three classes of antibiotics plus resistance to at least one aminoglycoside (gentamicin and/or streptomycin). The resistance to several antimicrobials shown by enterococcal strains obtained in this study is of concern because of the decrease in the therapeutic options for treatment of infections caused by enterococci.

Nosocomial outbreaks due to Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii in a Neonatal Intensive Care Unit (NICU) of the Uberlândia Federal University Hospital

O objetivo foi relatar a ocorrência de dois surtos subseqüentes na UTIN do HC-UFU, por amostras epidêmicas de P. aeruginosa e A. baumannii multirresistentes nos períodos de Mar - Set/01 e Out - Mar/02, respectivamente. O surto por P. aeruginosa incluiu sete neonatos com conjuntivite e três com bacteremia e um estudo caso-controle foi realizado no surto por A. baumannii com 11 e 22 neonatos respectivamente. Os isolados de A. baumannii foram resistentes a gentamicina e ciprofloxacina e os de P. aeruginosa a ampicilina/sulbactam além de gentamicina e ciprofloxacina. As culturas ambientais e das mãos dos profissionais de saúde foram negativas. O surto por P. aeruginosa resultou no aumento do uso de imipenem o que pode ter favorecido a emergência do surto por A. baumannii que embora suscetível a este b-lactâmico apresentou uma multiresistência importante. A análise univariada relacionou os fatores de risco predisponentes para infecção por A. baumannii: peso < 1500g, idade < 7 dias, hospitalização > 7 dias e uso de carbapenema. O término dos surtos foi alcançado através medidas de controle de infecção e isolamento de coorte dos neonatos infectados, não sendo possível definir o reservatório e a via de transmissão.

Conventional versus molecular tests (Multiplex PCR and PCR mecA gene) for detection of methicillin resistant Staphylococcus aureus

Nesse estudo, para detecção de S. aureus resistente à meticilina (MRSA), a amplificação do gene mecA baseada no multiplex PCR foi comparada com os testes de difusão com disco para 1 µg/mL de oxacilina, detecção da concentração inibitória mínima (CIM), meio de triagem com 4% de NaCl e 6 µg/mL de oxacilina. Na investigação de 24 isolados obtidos de sangue, o genótipo mecA foi detectado em apenas 16 (66,7%) dos isolados pelo multiplex PCR. A CIM apresentou valores variando de 0,19 a 512 µg/mL entre os isolados de MRSA. Os dados obtidos pelos testes de triagem e diluição em ágar apresentaram sensibilidades de 80,0% e 72,8% respectivamente, quando comparados com a presença do gene mecA (multiplex). Todos os isolados, incluindo os negativos, quando reavaliados com a técnica de PCR exclusivo para este gene, o resultado foi positivo. A produção de b-lactamase foi positiva em 20/25 (80,0%) dos isolados. Cerca de » dos pacientes evoluiu para óbito apesar da maioria (83,3%) ter sido tratada adequadamente. A identificação simultânea da bactéria e sua susceptibilidade aos antibióticos é necessária para a escolha de uma terapia adequada para casos de sepse estafilocócica, mas é importante considerar a sensibilidade, especificidade e validação dos kits disponíveis.

Nosocomial outbreaks due to Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii in a Neonatal Intensive Care Unit (NICU) of the Uberlândia Federal University Hospital

The study documents the occurrence of two subsequent outbreaks in the NICU of HC-UFU, caused by epidemic strains of multiresistant Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii, that occurred between March/01 and September and between October/01 and March/02, respectively. The P. aeruginosa outbreak included seven neonates with conjunctivitis and three with bacteremia. A case-control study was conducted for the A. baumannii outbreak, with 11 and 22 neonates, respectively. The isolates of A. baumannii were resistant to gentamacin and ciprofloxacin. P. aeruginosa isolates were resistant to ampicillin/sulbactam gentamicin and ciprofloxacin. The hands of healthcare workers and environmental cultures were negative. The outbreak of P. aeruginosa resulted in the increase of use of imipenem, which could have favoured the emergence of a A. baumannii epidemic strain, despite of its susceptibility to this antibiotic. The risk factors for A. baumannii infection were: weight 1500g, age 7 days, hospitalization > 7 days and use of carbapenems. Containment of the two outbreaks was achieved by introduction of strict hygiene measures and careful nursing care of the infected infants. The reservatory and the route of transmission were not found.

O objetivo foi relatar a ocorrência de dois surtos subseqüentes na UTIN do HC-UFU, por amostras epidêmicas de P. aeruginosa e A. baumannii multirresistentes nos períodos de Mar - Set/01 e Out - Mar/02, respectivamente. O surto por P. aeruginosa incluiu sete neonatos com conjuntivite e três com bacteremia e um estudo caso-controle foi realizado no surto por A. baumannii com 11 e 22 neonatos respectivamente. Os isolados de A. baumannii foram resistentes a gentamicina e ciprofloxacina e os de P. aeruginosa a ampicilina/sulbactam além de gentamicina e ciprofloxacina. As culturas ambientais e das mãos dos profissionais de saúde foram negativas. O surto por P. aeruginosa resultou no aumento do uso de imipenem o que pode ter favorecido a emergência do surto por A. baumannii que embora suscetível a este beta-lactâmico apresentou uma multiresistência importante. A análise univariada relacionou os fatores de risco predisponentes para infecção por A. baumannii: peso 1500g, idade 7 dias, hospitalização > 7 dias e uso de carbapenema. O término dos surtos foi alcançado através medidas de controle de infecção e isolamento de coorte dos neonatos infectados, não sendo possível definir o reservatório e a via de transmissão.

Conventional versus molecular tests (Multiplex PCR and PCR mecA gene) for detection of methicillin resistant Staphylococcus aureus

In this study, for detection of methicillin-resistant S. aureus (MRSA), a mecA multiplex PCR-based amplification was compared with the 1 µg oxacillin disk diffusion test, detection of minimal inhibitory concentration (MIC), and screening in agar with 4% NaCl and 6 µg/mL oxacillin. Among 24 isolates obtained from blood, mecA gene was detected in only 16 (66.7%) isolates by multiplex PCR. The MIC test showed a range of resistance to oxacillin from 0.19 to 512 µg/mL, among these isolates. Data obtained by screening and dilution tests showed that sensitivity to methicillin was 80.0% and 72.8%, respectively, when compared with the presence of mecA gene (multiplex). All isolates, including the negatives, when revaluated for mecA gene by PCR were positive. beta-lactamase production was positive for 20/25 isolates (80.0%). About » of patients died dispite most of them (83.3%) were adequately treated. The simultaneous identification of the bacteria and determination of this susceptibility to antibiotics are necessary for the choice of empiric antibiotic therapy in suspected staphylococcal sepse, but is important to considering the sensibility, specificity and validation of the available kits.

Nesse estudo, para detecção de S. aureus resistente à meticilina (MRSA), a amplificação do gene mecA baseada no multiplex PCR foi comparada com os testes de difusão com disco para 1 µg/mL de oxacilina, detecção da concentração inibitória mínima (CIM), meio de triagem com 4% de NaCl e 6 µg/mL de oxacilina. Na investigação de 24 isolados obtidos de sangue, o genótipo mecA foi detectado em apenas 16 (66,7%) dos isolados pelo multiplex PCR. A CIM apresentou valores variando de 0,19 a 512 µg/mL entre os isolados de MRSA. Os dados obtidos pelos testes de triagem e diluição em ágar apresentaram sensibilidades de 80,0% e 72,8% respectivamente, quando comparados com a presença do gene mecA (multiplex). Todos os isolados, incluindo os negativos, quando reavaliados com a técnica de PCR exclusivo para este gene, o resultado foi positivo. A produção de beta-lactamase foi positiva em 20/25 (80,0%) dos isolados. Cerca de » dos pacientes evoluiu para óbito apesar da maioria (83,3%) ter sido tratada adequadamente. A identificação simultânea da bactéria e sua susceptibilidade aos antibióticos é necessária para a escolha de uma terapia adequada para casos de sepse estafilocócica, mas é importante considerar a sensibilidade, especificidade e validação dos kits disponíveis.

Colonizaçäo por Staphylococcus aureus em portadores säos relacionados de uma creche de hospital universitário / Colonization by Staphylococcus aureus in healthy carriers from a nursery in a university hospital

O propósito deste estudo é verificar o quadro de colonizaçäo pelo Staphylococcus aureus entre portadores säos, relacionados, do Centro de Convivência Infantil do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeiräo Preto da Universidade de Säo Paulo (HCFMRP-USP), e conhecer algumas características bacteriológicas e moleculares das linhagens isoladas, com vistas ao estabelecimento de relações epidemiológicas entre as amostras. As amostras de S.aureus foram obtidas da cavidade nasal, mäo direita e mäo esquerda de 37 mäes ou responsáveis que trabalham no Serviço de Enfermagem do HCFMRP-USP, há mais de 6 meses e que utilizam o CCI durante a jornada de trabalho, 39 filhos ou dependentes das mesmas e de 39 funcionários que prestam assistência às crianças durante a estada no centro. Desse total, foram isoladas 55 amostras, das quais 58,2 por cento, da cavidade nasal, 20,0 por cento da mäo direita e 21,8 por cento da mäo esquerda, demonstrando predominância de colonizaçäo na cavidade nasal. Os resultados do antibiograma sugeriram a caracterizaçäo de amostras com modelos de resistência a, no máximo, dois antimicrobianos. A análise dos padrões de restriçäo por Pulsed Field Gel Electrophoresis, utilizando-se a enzima de restriçäo Sma I e as avaliações de similaridade que foram estimadas por dendogramas, demonstraram baixa similaridade genética entre os portadores, principalmente entre os funcionários do CCI e as crianças atendidas por eles. A maior similaridade genética foi observada entre algumas crianças e suas respectivas mäes ou responsáveis. O estudo genotípico teve um papel importante no delineamento e comparaçäo das amostras de S.aureus dos portadores, já que só o antibiograma näo daria parâmetros suficientes para uma precisa relaçäo epidemiológica entre as amostras dos portadores säos, mencionados neste estudo

Diagnóstico bacteriológico das infecçöes do trato urinário: uma revisäo técnica / Bacteriological diagnostic of urinary tract infections: a technical revision

Entre as doenças mais comuns está a infecçäo do trato urinário, afetando mais de um sítio ou um único local como a uretra (uretrite), próstata (prostatite), bexiga (cistite) ou rins (pielonefrite). A urina é considerada estéril e pode sofrer contaminaçäo de bactérias da pele, da roupa ou da genitália. Por isso, se näo colhida, armazenada e transportada adequadamente, pode-se obter falsos resultados em exames bacteriológicos. Bactérias da família Enterobacteriacea estäo envolvidas em quase todas as uretrocistites näo gonocócicas, sendo a Escherichia coli o agente causal de aproximadamente 80 por cento dos casos entre mulheres na idade fértil, sem lesöes do trato urinário. Outros microrganismos, incluindo Klebsiella sp., Enterobacter sp., Proteus sp., Pseudomonas sp. e Enterococcus sp., säo freqüentemente encontrados em pacientes com lesöes obstrutivas ou doenças paralíticas, afetando a funçäo renal. Staphylococcus saprophyticus é um importante patógeno oportunista na infecçäo do trato urinário em humanos, especialmente em mulheres jovens, sexualmente ativas. O paciente deve ser informado quanto aos procedimentos recomendados, relacionados com o horário da colheita, modo de obtençäo e toda a assepsia necessária, assim como o profissional deve estar bem atualizado quanto às técnicas utilizadas para o isolamento, identificaçäo e antibiograma. Atualmente, existem métodos químicos automatizados e kits excelentes para o diagnóstico presuntivo de infecçöes urinárias, auxiliando e agilizando os processos de identificaçäo e de tratamento eficaz ao paciente infectado.